Отправить письмо
Алкор БИО
Русский
Задать вопрос

Немодифицированые олигонуклеотиды

Олигонуклеотиды – относительно короткие (от 10 до 150 оснований) фрагменты нуклеиновых кислот с заранее заданной последовательностью, которые используются при проведении стандартной ПЦР, ПЦР в режиме реального времени, биочиповых технологиях, секвенировании, клонировании и др.

Синтез олигонуклеотидов осуществляется амидофосфитным методом  с использованием автоматического синтезатора:

Амидофосфитный метод синтеза                              

     Синтез олигонуклеотидов проводится путем наращивания олигонуклеотидоной цепи соответствующим активированным мономером. Синтетический цикл состоит из следующих стадий:

1) Удаление тритильной защиты (в результате чего образуется предшественник олигонуклеотида с ОН-группой на месте удаленной ДМТ-группы);

2) Конденсация мономера с закрепленной на твердофазном носителе растущей цепью олигонуклеотида (образуется связь фосфора с кислородом свободной ОН-группы);

3) Кэпирование (для блокирования непрореагировавших свободных ОН-групп);

4) Окисление нестабильной трёхкоординированной фосфитной группы в устойчивую фосфодиэфирную группу.

По завершении синтеза олигонуклеотид снимается с полимерного носителя, производится стадия деблокирования, и далее он подвергается очистке.

         В нашей работе мы используем высокопроизводительный планшетный ДНК-синтезатор ASM-2000, что вместе с высокой чистотой используемых реагентов (растворители, фосфорамидиты и пр.) дает высокую точность синтеза, стабильный выход, а также высокую скорость выполнения заказа.

 
«Алкор Био» © 2010 | Для писем: 192148, С-Петербург, а/я 44