Системы забора крови и интерференция в иммуноанализе
Авторы: Г. С. Власов, А.М. Пономарева, Д. Г. Полынцев, В. А. Головаченко, Д.В. Фадин
Источник: Клиническая лабораторная диагностика № 4,2007,стр. 24-29.
Для клинического иммунохимического анализа, как правило, используются образцы сыворотки, которые получают с помощью различных систем забора крови. Широкое распространение получили вакуумные и не вакуумные системы с активаторами свертывания и разделительными компонентами.
На рынке появилось большое количество одноразовых расходных материалов для забора крови, ускоряющих ее коагуляцию и оптимизирующих процесс отделения сыворотки от сгустка. [1, 2, 4,17, 27]. Наряду с известными производителями систем забора крови BectonDickinson, США; GreinerBioOneGmbH, Австрия; TerumoEuropeN.V., Бельгия; SarstedtAG&Co, Германия и др. предлагают свою продукцию более десяти новых компаний.
К сожалению, в инструкциях по применению, технических бюллетенях и даже в патентах не приводится необходимая информация о составе и свойствах всех добавок. Большинство компаний-производителей и дистрибьюторов умалчивают или не знают о возможных ошибках в иммуноанализе при использовании систем забора крови. Действующие международные стандарты, определяющие требования и методы контроля производства устройств для забора крови, не требуют испытаний влияния добавок на иммунохимический анализ [24, 32].
С другой стороны, производители анализаторов и наборов реагентов не имеют реальной возможности провести контроль влияния добавок на иммуноанализы, в связи с большим разнообразием вакуумных и не вакуумных систем забора крови.
Цель настоящего обзора: на основе доступной научной литературы рассмотреть механизмы влияния добавок на иммунохимический анализ и вопросы контроля и профилактики данного вида интерференции.
Физико-химические свойства добавок
Подробное описание современных устройств для забора крови можно найти в монографиях и практических руководствах [1,4, 17, 27]. В рамках данного обзора мы считаем необходимым остановиться только на одной из главных составных частей систем - пробирках, которые являются значительно более сложными устройствами, чем обычно представляет персонал клинических лабораторий. Включая многочисленные реагенты (добавки, наполнители; Табл. 1), стеклянные или пластмассовые пробирки влияют на формирование сгустка, на взаимодействие с поверхностью пробирок, могут выделять вещества в образец или адсорбировать аналиты из образца.
Табл.1
Виды добавок в системах забора крови
а. активаторы свертывания крови: - запуск коагуляционного каскада по внутреннему механизму (двуокись кремния или его производные); - запуск коагуляционного каскада по внешнему механизму (тромбин); б. иммобилизаторы активаторов свертывания; в. поверхностно-активные вещества ( ПАВ или сурфактанты). |
а. разделительные гранулы из полистирола; - модификаторы поверхности гранул; б. разделительные гели: - полиэфирные гетерополимеры (олефиновый, силоксановый, акриловый); - гель-модифицирующие добавки. |
|
Поверхность химически чистых стеклянных пробирок, обладая преимущественно гидрофильными свойствами, сама по себе активирует свертывание крови. В таких пробирках быстро образуется сгусток, который хорошо отделяется от стенок, в связи с низкой адгезией клеток и других компонентов крови. Для ускорения свертывания ряд компаний-производителей добавляют в стеклянные пробирки тромбин, запускающий коагуляционный каскад по внешнему механизму. Кроме этого, как вакуумные, так и не вакуумные стеклянные пробирки могут иметь разделительный гель или гранулы. Для уменьшения уровня гемолиза внутренняя поверхность стеклянных пробирок иногда обрабатывается поверхностно-активными веществами (ПАВ).
Пластмассовые пробирки обладают рядом преимуществ по сравнению со стеклянными: они дешевле, не бьются, имеют меньший вес, лучше подходят для автоматических систем обработки образцов крови и удобны при утилизации.
Очевидно, что к главному преимуществу пластмассовых пробирок следует отнести безопасность медперсонала при работе с кровью. Пробирки из полимеров не могут вызвать повреждений кожных покровов, устойчивы к механическим воздействиям, что существенно снижает риск заражения персонала лабораторий гемоконтактными инфекциями [17, 27].
При переходе на пластмассовые пробирки потребовалось использование дополнительных видов добавок. Преимущественно гидрофобная поверхность пластмассовых пробирок более медленно активирует свертывание крови, в большей степени адсорбирует клетки и другие компоненты образца. В результате сгусток крови хуже отделяется от стенки пробирки, чаще наблюдается гемолиз.
Для ускорения свертываемости крови используют диоксид кремния или его производные, которые равномерно наносят на внутреннюю поверхность пробирок вместе с водорастворимыми полимерами (поливинилпирролидон и др.). С целью снижения адгезии клеток крови добавляют ПАВ (ионогенные и неионогенные синтетические полимеры). С помощью распылительного устройства смеси соединений наносятся на внутреннюю поверхность пробирок и высушиваются.
Для облегчения получения сыворотки используют разделительные гранулы и гели, которые при центрифугировании свернувшейся крови образуют барьер между сывороткой и сгустком крови. Разделительные гранулы представляют собой частицы из полистирола, поверхность которых может быть модифицирована, в том числе ПАВ.
Особым разнообразием химического состава отличаются разделительные гели. В настоящее время используются три основных типа гелей: олифиновые, силоксановые и акриловые. Они состоят из основного вещества полиэфирного гетерополимера и различного типа добавок. Физико-химические свойства геля (удельный вес 1,04 - 1,05 г/см, вязкость 20000 - 80000 cpS , текучесть и тиксотропность) определяются соотношением гетерополимера и различных добавок, некоторые из них обладают значительной поверхностной активностью при низких концентрациях [28].
В качестве добавок, регулирующих удельный вес и вязкость гелей, в последнее время используют преимущественно органические соединения. Их перечень большой по количеству и по разнообразию структуры: первичные, вторичные, третичные и четвертичные амины с алифатическими радикалами от 8 до 24 атомов углерода; сополимеры полидиметилсилоксана с оксиалкиленом или полиоксиэтилена с монолауратом или с триизостеаратом; многоатомные спирты и амиды жирных кислот и т. д. В органической химии аналогов указанных соединений очень много, и все они могут быть использованы как гель-формирующие добавки.
Поэтому заявления некоторых компаний и дистрибьюторов о химической инертности добавок систем забора крови следует отнести к недобросовестной рекламе.
Интерференция в иммуноанализе
Учитывая, что большинство ведущих компаний постоянно вносят изменения в технологию производства систем для забора крови, а иммунохимические лаборатории переходят на новые поколения диагностических систем, в данном обзоре будет приведена доступная информация только за последние годы.
В августе - октябре 2004 года на сайте компании BectonDickinson (BD) www.bd.com опубликовано 12 технических бюллетеней, предупреждающих клиентов об интерференции в иммуноанализе при использовании стеклянных и пластмассовых пробирок с гелем и активатором свертывания (BDVacutainer®SST™ glassandPlus, plastic), BDVacutainer®SST™ II) и микропробирок для капиллярного забора крови (BDMicrotainer®).
Установлено положительное или отрицательное смещение значений для гормонов, онкомаркеров и инфекционных маркеров на различных типах автоматических анализаторов. В таблице № 2 суммирована информация, опубликованная на сайте компании.
Табл. № 2
Компания производитель, диагностическая система |
Вид анализа и результаты исследования |
Номер технического бюллетеня |
Abbott Diagnostics AUZYME Monoclonal assay |
Поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg) Увеличение уровня на 3-20% |
VS7310 VS7313 |
Bayer Healthcare Diagnostics Division ADVIA ®Centaur, ACS;180® |
Общий Т3 положительное смещение, среднее значение - 27%; Общий Т4 полож. смещение, ср.- 18% Фолат полож. смещение, ср.- 32% Вит. В12 полож. смещение, ср. - 38% CA27.29 полож. смещение, ср.- 19% ФСГ отр. смещение, среднее значение – 26% |
VS7298 VS730-exUS VS7312-exUS VS7311-US VS7312-exUS |
Beckman Coulter,Inc Acces® , Access®2 UniCel™DxI800, SYNCHRONLX®1725 |
Общий Т3 полож. смещение, >50% |
VS7298 VS730-exUS |
Diagnostics Products Corporation (DPC) IMMULITE®, IMMULITE® 1000, IMMULITE® 2000, IMMULITE®2500, |
Общий Т3 полож. смещение 20 - 30% Общий Т4 полож. смещение 20 - 30% Кортизол полож. смещение 20 - 30% ФСГ отриц. смещение 15 - 20% |
VS7504 – US VS7305-ex US VS7345 |
Во всех конкурентных типах иммунохимического анализа наблюдалось положительное смещение значений реакции. При определении фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) в двух диагностических системах с неконкурентным форматом анализа («сэндвич» метод), установлено снижение концентрации аналита (отрицательное смещение) по сравнению с контрольными пробами.
На первом этапе специалисты компании BDрекомендовали использовать стеклянные и пластмассовые пробирки для получения сыворотки без геля (BDVacutainer®serumtuber), а при интерпретации результатов учитывать другие лабораторные исследования и клиническое состояние пациента.
Кроме этого, было установлено, что при определении общего трийодтиронина (Т3об) на анализаторах Immulite®наблюдается существенная разница в значениях при использовании образцов, полученных в стеклянных и пластмассовых пробирках без разделительного геля. Пробирки с активатором свертывания и гелем SST™ IIоказывали влияние на анализ Т3об, но не на тироксин при измерении на анализаторах BeckmanCoulter, Inc.
В июле 2005 года появилось краткое сообщение [11] о влиянии на иммуноанализ систем забора крови компании TerumoEuropeN.V. (Бельгия). На анализаторе Immulite®2000 образцы сывороток, полученные с помощью пробирок с активатором свертывания VenosafeSPи с активатором свертывания и гелем VenosafeSAS, вызывали положительное смещение при определении кортизола (+ 20%) и отрицательное смещение для лютеинизирующего гормона (- 20%) и ФСГ (- 7%).
Сравнительная оценка интерференции трех типов вакуумных пробирок: пластмассовых Vacuette® S. T.с активатором и гелем ( GreinerBio-OneGmbH, Австрия), стеклянных BDVacutainer® без добавок и пластмассовых BDVacutainer®SST™ cактиватором свертывания и гелем показала, что при измерении на анализаторе Immulite®2000 значение Т3об было выше с пробирками Vacutainer® SST™ ( 2,81 нмол/л), чем со стеклянными пробирками Vacutainer®(2,15 нмол/л) и с пластмассовыми пробирками Vacuette (2,24 нмол/л). Параллельные исследования, проведенные на анализаторе AxSYM (AbbottLab.), не выявили существенных различий [10].
В более ранних работах сходные проблемы возникали, но не получили должного внимания со стороны производителей систем забора крови и наборов иммунохимических реагентов. Так, FerryJ.D. с соавт. в 1999 году неожиданно обнаружили значительное повышение концентрации прогестерона в образцах сыворотки, взятых в пробирки с активатором свертывания и гелем (BD) при измерении на анализаторе Elecsys®2010 RocheDiagnostics. Неблагоприятный эффект усиливался с увеличением продолжительности хранения сыворотки в пробирке с гелем и уменьшением объема образца [18] . BushV.J. с соавт. в 2001 году установили статистически достоверную разницу при определении СА-125 (AxSYM, AbbotLab.), эстрадиола (IMx, AbbotLab.) прогестерона (OpusMagnum, AbbotLab) в сыворотках, полученных в пробирках с активатором свертывания и гелем BDVacutainer®SST™ и SST™ Plus, если образцы хранились в них 24 часа [12]. KalineA.S. с соавт. [21] в 2002 году на анализаторах Immulite®2000 и ACS180 plusпоказали значительное повышение концентрации Т3св при хранении сыворотки в стеклянных пробирках с гелем BDVacutainer®SST™. ChangC.Y. с соавт. в 2003 году при использовании теста VitrosCRPслучайно обнаружили значительные различия в содержании С-реактивного белка (СРБ) в сыворотках, полученных в пробирках с гелем SST и пробирках без геля. Смешивание этих сывороток приводило через 15 минут к резкому подъему уровня СРБ [8, 14]. Сходные результаты установлены при определении витамина В12 на анализаторе CentaurBayerHealthcare . Смешивание сывороток приводило к увеличению концентрации аналита на 54% [26]. Неожиданно авторы обнаружили, что повторное центрифугирование пробирок с гелем или аликвот сыворотки во вторичных пробирках перед их исследованием частично устраняет интерференцию в иммуноанализе. В ряде публикаций установлены статистически достоверные различия в значениях иммунопроб между стеклянными и пластмассовыми пробирками при исследовании гормонов и онкомаркеров, но они не имели клинически значимой разницы [9, 29, 31].
Причины и механизмы интерференции
Хотя факт влияния различных добавок систем забора крови на иммунохимический анализ установлен, причины и механизмы данного типа интерференции остаются неясными и требуют дальнейшего изучения.
Существуют мнение, что главной причиной влияния на анализы добавок пробирок BDявляются ПАВ, относящиеся к классу неионогенных органоселиконов, торговая марка SilwetL-720. Согласно патенту они используются для покрытия внутренней поверхности пластмассовых пробирок, снижая адсорбцию клеток крови [11].
Полученные к настоящему времени данные свидетельствуют, что Silwet L-720 в концентрациях 0 до 400 мг/л не влияет на активность щелочной фосфатазы, субстрат и хемилюминесценцию в аналитической системе Immulite® (11). Это подтверждает наличие интерференции только с некоторыми видами тест-систем в исследованных до настоящего времени анализаторах с данным типом детекции иммунохимической реакции.
Добавление Silwet L-720 в сыворотку крови, полученную с помощью стеклянных пробирок, вызывало зависимое от дозы положительное смещение результатов анализа Т3об, когда измерение проводилось на Immulite®, но не на анализаторе AxSYM[11].
Есть несколько возможных объяснений установленных различий.
Во-первых, при постановке конкурентного анализа на Immulite® используется одностадийная реакция, в то время как в системе AxSYM- двухстадийная. Дополнительная отмывка в формате иммунной реакции AxSYM, возможно, более эффективно удаляет ПАВ и предотвращает его связывание с микрочастицами и/ или с антителами на поверхности микрочастиц. Во-вторых, время инкубации сыворотки с ПАВ микрочастиц, покрытых антителами, в AxSYMанализе меньше, чем инкубация в системе Immulite®. Возможно, что это приводит к уменьшению влияния ПАВ на микрочастицы и / или антитела на поверхности микрочастиц. В-третьих, различия в количестве и типе антител, используемых в тест-системах, могут вносить свой вклад в различия двух диагностических систем.
Известно, что ПАВ прочно сорбируются к гидрофобной поверхности твердой фазы, вытесняя менее гидрофобные молекулы антител [30, 36] .
Прямые доказательства десорбции твердофазных антител при определении Т3об под влиянием Silwet L-720 установлены с помощью СДС-электрофореза сыворотки в полиакриламидном геле с последующим иммуноблотингом. Количественная оценка результатов исследований показала дозозависимую десорбцию мышиных IgG-антител против Т3 с поверхности полистироловых шариков [11].
С другой стороны, полидиметилсилоксаны с их липофильными свойствами могут присоединяться и индуцировать конформационные изменения в антителах независимо от типа твердой фазы (28).
В любом случае, в конкурентном анализе уменьшение количества или иммуноспецифической активности твердофазных антител приведет к снижению уровня связывания меченого аналита, что в свою очередь вызовет уменьшение сигнала и ложное увеличение концентрации аналита (положительное смещение). В неконкурентных пробах прямая зависимость уровня сигнала и концентрации аналита, поэтому будет наблюдаться снижение концентрации исследуемого соединения (отрицательное смещение).
Причина различной чувствительности к ПАВ тест-систем двух форматов, вероятно, связана с тем, что в неконкурентных пробах используют избыток твердофазных и детектируемых антител, поэтому они менее подвержены частичной десорбции с твердой фазы и/или возможной денатурации антител. Причина в различной степени интерференции при сходных концентрациях ПАВ в конкурентных пробах может быть связана с различиями в силе нековалентного связывания антител различных типов или твердых фаз, используемых в каждом виде пробы. Кроме этого, объем образца может значительно отличаться, изменяя конечную концентрацию ПАВ в различных тест-системах.
Показано прямое воздействие ПАВ на связывание авидина и биотина в радиоиммуноанализе, которое приводит к отрицательному смещению результатов анализа тиреотропина, пролактина и человеческого гонадотропина [35].
Не исключена возможность проникновения компонентов покрытия внутренней поверхности пробирок или геля в сыворотку и воздействия их на связь аналитов с сывороточными белками [18].
На степень интерференции влияют также продолжительность контакта крови с пробиркой, степень перемешивания, температура окружающей среды и условия транспортировки образцов [8, 9,12, 14, 18, 20, 24, 27].
Следовательно, влияние добавок, выделяющихся в образец сыворотки, на результаты иммуноанализа зависит от большого количества факторов и, вероятно, может иметь несколько точек приложения в различных диагностических системах. Очевидно, будут отличаться и пути решения данной проблемы.
В апреле 1999 в ответ на рекламации потребителей компания Roche Diagnostics начала выпуск нового набора на прогестерон (Elecsys Progesterone II), изменив технологию производства и состав реагентов для определения этого гормона [20].
В ноябре 2004 года компания BD выпустила новые пробирки с активатором свертывания и гелем (BD Vacutainer® SST™ II, adjusted tubes), уменьшив содержание сурфактанта Silwet L-720 в них. [11, 33]. Однако в опубликованных к настоящему времени работах получены неоднозначные данные. В одних исследованиях установлено, что сыворотки, собранные в модифицированные пробирки, не приводят к клинически значимой разнице в результатах анализов, хотя статистически достоверные различия установлены [10, 34]. В других погрешность измерения достигает 15 % по сравнению с контрольными пробами [19].
В начале 2005 года компания Terumo Europe N.V. начала производство новых пробирок, исключив полипропиленглюколь из состава добавок [ 11].
Известны публикации, подтверждающие сорбцию аналитов на поверхности пробирок и/или разделительном геле [23] . Особенно наглядно эта проблема проявилась в связи с широким распространением в клинической практике иммунохимического анализа лекарственных средств.
Так, Dasgupta A. c соавт. показали значительное снижение (от 5,9% до 64%) концентрации различных лекарственных средств при хранении образцов сыворотки в пробирках с гелем BD Vacutainer® SST™. Сорбция была подтверждена экстракцией лекарств из геля метанолом и зависимостью снижения концентрации аналита от объема сыворотки и длительности ее инкубации с гелем [15].
В 1999 - 2000 годах компании BD и Greiner Bio-One GmbH разработали новые разделительные гели специально для лекарственного мониторинга. Сорбционная активность модифицированных гелей или не наблюдалась, или была значительно снижена к широкому спектру терапевтических средств [13], однако постоянно появляются публикации об интерференции в иммуноанализе при количественном определении отдельных лекарств. Так, установлено значительное снижение концентрации циклических антидепрессантов при хранении образцов сыворотки в пробирках Vacuette®(GreinerBioOneGmbH) с гелем [16].
Очевидно, что разработка универсального разделительного геля практически не решаемая задача, в связи с исключительным разнообразием физико-химических свойств терапевтических средств. Совершенствование технологии производства приведет к созданию более стабильных гелей с улучшенными тиксотропными свойствами, но исключить возможность сорбции низкомолекулярных лекарственных средств в каждом конкретном случае могут только контрольные испытания. В связи с этим и оптимальная продолжительность хранения образца сыворотки в пробирке может быть определена для конкретного аналита только опытным путем.
Контроль и профилактика интерференции.
Контроль интерференции в иммуноанализе, вызванной добавками систем забора крови - сложная проблема для клинических лабораторий.
Прежде всего, сотрудники лабораторий должны хорошо знать причины и механизмы данного вида интерференции и проявлять повышенное внимание при смене лота, вида, типа или производителя систем забора крови. Общепринятый аналитический контроль качества с использованием контрольных сывороток в данном случае не может выявить ошибки исследований [25].
В большинстве клинических лабораторий образцы аттестованных контрольных сывороток переносят из флакона во вторичную пробирку, а затем помещают в анализатор. В отличие от образцов пациентов, они не проходят стадию воздействия добавок систем забора крови. Таким образом, нарушается главный принцип внутрилабораторногоконтроля качества - контрольный образец должен проходить все стадии обработки, как и образец пациента. [3, 9, 5].
По этой причине в течение многих лет потребители пробирок BD, TerumoEuropeN.V. и, вероятно, рядадругих компаний-производителей не замечали систематической погрешности в исследовании ана-литов, когда проводили исследования на указанных диагностических системах. Не обнаружили значительную систематическую ошибку и органы государственной внешней оценки качества и многочисленные независимые программы внешнего контроля в странах, где указанные типы автоматических анализаторов широко распространены.
Клинические лаборатории, обслуживающие одно или несколько лечебных учреждений, имеют больше возможностей в контроле и профилактике интерференции это типа. Проблема может быть решена введением организационных мероприятий и дополнительных методов контроля, позволяющих выявить системную ошибку на преаналитическом этапе исследования. Одним из таких методов, который широко используется, но оказался в данном виде интерференции неэффективным, является метод контроля по «ежедневным средним» [5, 6]. Вероятно, при правильном подборе однородных групп пациентов, аналита с узким диапазоном концентраций и корректной оценке статистических данных, смещение результатов анализов было бы замечено.
Однако более результативным подходом к профилактике системной погрешности в небольших лечебно-профилактических учреждениях будет централизованная закупка лабораторией расходных материалов для забора крови одного лота, типа и производителя и оценка их в контрольных исследованиях.
Для этих целей можно использовать один из двух наиболее простых методов. Прямой, когда равный объем контрольной сыворотки помещается в тестируемую пробирку и проходит все этапы обработки вместе с пробирками, содержащими образцы. Контрольные сыворотки, предварительно заготовленные в лаборатории с известной концентрацией аналита, не должны быть контаминированы добавками пробирок. Сравнение результатов для контрольных сывороток, которые подвергались и не подвергались воздействию добавок, должно выявить неблагоприятное влияние добавок пробирок.
Непрямой метод: «проба с открытием» - широко используется для оценки аналитической точности иммунохимических тест-систем. Во
вторичную пробирку или лунку планшета добавляют равные объемы контрольной аттестованной сыворотки и опытной сыворотки, полученной с помощью тестируемых пробирок. Соответствие измеренной концентрации аналита, ожидаемой в пределах от 90 до 110%, будет свидетельствовать об отсутствии данного типа интерференции.
Такой подход в небольших лабораториях может обеспечить контроль интерференции в иммуноанализе, возникающей от смены систем забора крови в настоящее время.
В крупных диагностических центрах установить данный тип интерференции практически невозможно. Образцы для анализа поступают из различных больниц, поликлиник города или клинических лабораторий других регионов. В различных лечебных учреждениях могут использоваться различные типы и виды систем забора крови. По известным причинам будут отличаться и условия взятия, обработки и хранения образцов, а также время их доставки в диагностический центр.
Очевидно, в данном случае только производители систем для забора крови и диагностических наборов реагентов, зная источник и механизмы интерференции, могут за счет изменения технологии и введения дополнительных контрольных испытаний минимизировать интерференцию иммунохимического анализа в будущем.
Заключение и выводы
Необходимо отметить, что это проблема не только аналитических систем, перечисленных в таблице № 2. Впервые феномен влияния добавок систем забора крови на иммуноанализ подробно изучен на этих автоматических анализаторах в сочетании с некоторыми видами пробирок BD, в виду широкого их использования в лабораториях ряда стран. Возможность интерференции в иммуноанализе следует ожидать в других диагностических системах, особенно когда антитела иммобилизируются на твердофазном носителе методом сорбции и используется конкурентный формат реакции.
Компания BD совместно с производителями диагностических систем в течение года провела исследования причин интерференции, внесла изменения в технологию производства пробирок и организовала расширенные клинические испытания скорректированных по добавкам пробирок. Потребители наборов реагентов и систем забора крови на всех этапах решения данной проблемы получали необходимую информацию и рекомендации по профилактике интерференции.
В письме руководителям лабораторий были сформулированы общие принципы ретроспективной проверки недостоверных лабораторных исследований. Рекомендовано информировать врачей-клиницистов, и, если диагноз базировался исключительно на результатах лабораторных данных, провести повторное обследование пациентов.
Как будет решаться данная проблема другими производителями системы забора крови и диагностических наборов реагентов, прогнозировать очень трудно, так как многое зависит от объединения их усилий и от активности контролирующих государственных органов.
В ближайшие годы производители диагностических наборов и систем забора крови должны решить данную проблему интерференции и можно надеяться, что соответствующая информация будет приведена в инструкциях по применению изделий.
В настоящее время следующие рекомендации помогут специалистам клинических лабораторий избежать интерференции в иммуноанализе, вызванной добавками систем забора крови:
1. При введении в практику лаборатории новых видов вакуумных и невакуумных систем забора крови учитывать возможность интерференции в иммунохимическом анализе. В обязательном порядке получать необходимую информацию у производителей диагностических наборов. Если данный вид систем забора крови не прошел проверку с используемыми тест-системами, то с помощью дополнительных методов внутрилабораторного контроля качества оценить возможность ошибки исследований.
2. При введении в практику лаборатории нового иммунохимического анализатора или при постановке нового метода исследования необходимо иметь гарантию производителя на отсутствие интерференции в иммуноанализе данного аналита с конкретными системами забора крови. В противном случае необходимы контрольные испытания возможности интерференции в иммуноанализе, особенно при расхождении результатов лабораторных исследований и клинического состояния пациента.
3. Допустимая продолжительность хранения образца сыворотки в вакуумных и невакуумных пробирках для каждого аналита зависит от многих факторов. Если она не исследовалась производителем диагнос-тических наборов, то желательно либо максимально уменьшить срок хранения сыворотки, либо доставлять ее в лабораторию во вторичных пробирках. При сомнительных результатах анализа - определить время и условия хранения сыворотки опытным путем.
Литература.
- Гудер В. Г., Нарайанан С., Виссер Г. и др. Пробы: от пациента до лаборатории. Влияние факторов преаналитического этапа на качество результатов лабораторных исследований, Мюнхен, 2 издание, GITVERLAG, 2001.
- Инструкция о соблюдении противоэпидемического режима при взятии венозной крови в учреждениях здравоохранения г. Москвы. Центр ГСЭН, г. Москва, 2002.
- Назаренко Г. И. Кишкун А. А. Управление качеством лабораторных исследований. Москва, «Медицина», 2001.
- Обеспечение качества лабораторных исследований. Преаналитический этап. Справочное пособие под редакцией В. В. Меньшикова, Москва, «Юнимед-пресс», 2003.
- Основы статистики и методы ведения внyтрилабораторного контроля качества. Руководство для врача клинической лабораторной диагностики. Москва. 2002 г.
- Правила проведения внутрилабораторного контроля качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов. ОСТ.2003 г.
- Управление качеством клинических лабораторных исследований. Нормативныедокументы. Москва-Лабпресс. 2000.
- AndersonNR, Chatha K, Holland MR et al. Interference caused by the contents of serum separator tubes in Vitros CRP assay. Ann Clin Biochem 2004; 41: 171-172
- Boeynaems JM, De Leener A, Dessars B. Evaluation of new generation of plastic evacuated blood-collection tubes in clinical chemistry, therapeutic drug monitoring,hormone and trace metal analysis. Clin Chem Lab Med 2004; 42: 67-71
- Bowen RAR, Chan YC, Rehak NN et al. Effect of blood collection tubes on total triiodothyronine and other laboratory assays. Clin Chem 2005; 51: 323-333
- Bowen RAR, Chan YC, Ruddel ME et al. Immunoassay interference by a commonly used blood collection tube additive, the organosilicone surfactant Silwet L-720. Clin Chem 2005; 51:1874-1882
- Bush VJ, Janu MR, Bathur F et al. Comparison of BD Vacutainer SST™ plustubes with BD SST™ II plus tubes for common analytes. Clin Chem Acta 2001; 306: 139-143
- Bush VJ, Blennerhasset J, Wells A. Stability of therapeutic drugs in serum collection in vacutainer serum separator tubes containing a new gel (SST II).Ther Drug Monit 2001; 23: 259-262.
- Chang CY, Lu JY, Chien TI et all. Interference caused by the contents of serum separaror tubes in the Vitros CRP assay. Ann Clin Biochem 2003; 40: 249-251.
- Dasgupta A, Dean R, Saldona S et all. Absorption of therapeutic drugs by barrier gels in serum separator blood collection tube. Volum - and time-dependent reduction in total and free drug concentrations. Am J Clin Pathol.1994; 101: 456-461.
- Dasgupta A, Yared MA, Well A. Time-dependent absorption of therapeutic drugs by the gel of Greiner Vacuette blood collection nube. Ther Drug Monit. 2000; 22; 427-431.
- Ernst DJ. Applied phlebotomy. ( 2005) Lippincott Williams & Wilkins
- Ferry JD, Collins S, Sykes E. Effect of serum volume and time of exposure to gel barrier tubes on results for progesterone by Roche diagnostics Elecsys 2010 Clin Chem 1999; 45:1574-1575.
- Ferry JD, Peterson V, Tushman D. Test tube interference: life in the laboratory after February 11,2004. J Clin Lig Assay 2005;28:6-9.
- Henne V. A representative of Roche diagnostics responds. Clin Chem 1999; 45: 1575.
- KilineAS, Duzoylum A, Unecugil CF et all. Falsely increased free Triiodothyronine in sera stored in serum separator tubes. Clin Chem 2002; 48: 2296-2297.
- Klee GG. Interferences in hormone immunoassay. Clin Lab Med 2004; 24:1-18.
- Krapf FE. Stability of clinical chemistry analytes in blood collection Clin Chem 2005;51: 1767.
- Kricka LJ, Park JY. Additive-aggravated assays: an authoritative answer. Clin Chem 2005; 51: 1373.
- Kricka LJ, Park JY, Senior MB et al. Processing control in blood collection tube reveals interference Clin Chem 2005; 51: 2422-2423.
- Lowrey I, Smith G. Elevated results in a vitamin B12 assay when using serum separator blood collection tubes. Ann Clin Biochem.2003; 40: 560-562.
- McCall RE, Tankersley CM. ( 2003) Phlebotomy Essentials, third edition. Lippincott Williams & Wilkins.
- Pendergraph GE, Pendergraph CB. (1998) Handbook of phlebotomy and patient service techniques, forth edition, Williams&Wilkins.
- Park JH, Bae YH. Hydrogels based on poly(ethylene oxide) and poly(tetramethylene oxide) or poly(dimethyl siloxane): synthesis, characterization, in vitro protein adsorption and platelet adhesion. Biomaterials 2002; 23: 1797-1808.
- reissner CM, Reilly WM, Cyr RC et al. Plastic versus glass tubes: effect on analytical performance of selected serum and plasma hormone assays. Clin Chem 2004; 50: 1245-1247.
- Selby C. Interference in immunoassay. Ann Clin Biochem 1999; 36:704-721
- Smets EM, Dijkstra-Lagemaat JE, Blankenstein MA. Influence of blood collection in plastic vs. glass evacuated serum-separator tubes on hormone and tumor marker. Clin Chem Lab Med.2004; 42: 435-439.
- Single-use container for venous blood specimen collection. ISO 6710:1995 (E).
- StankovicAK, Parmar G. Assay interferences from blood collection tubes: a cautionary note. Clin Chem 2006; 52: 1627-1628
- Wang S, Ho V, Roquemore-Goins A et al. Effects of blood collection tubes, including pediatric devices, on 16 common immunoassays Clin Chem 2006; 52: 892-893.
- Wickus GG, Mordan RJ, Matheus EA Interference in the Allegro immunoassay system when blood is collected in silicone-coated tubes ( Letter ). Clin Chem 1992; 38: 2347-2348.
- Wood WG, Gadow A. Immobilization of antibodies and antigens on macro solid phases - a comparison between adsorptive and covalent binding. A critical review of macro solid phases for use in immunoassay systems. Part 1. J Clin Chem Clin Biochem 1983; 21; 789-797.